为了确保及时地获取解决方案,请在联系我们时准备好以下信息。
常见问题
- 公司/大学名称。
- 显微镜/成像系统类型。
- 激发源(特定激光、水银灯等)。
抗体信息
- 货号。
- 批号(印在试管标签上)。
- 使用的稀释度。
- 二抗(如果没有使用偶联抗体)。
- 二抗供应商/货号。
- 荧光物质(如FITC)。
- 二抗稀释度。
- 您是否将此二抗成功用于免疫荧光法?
样本
- 类型:
- ICC/细胞系
- 石蜡切片
- 固定的冷冻切片
- 新鲜的冷冻切片
- 样本来源(细胞系或组织、物种)。
- 固定前如何处理细胞/组织(配体、抑制剂等)?
- 固定方法(浸入液体、灌注)。
- 描述固定和样本制备方案,包括固定剂类型、孵育时间及浓度。
- 如果使用细胞系,细胞处理后与固定前之间相差多长时间?
- 切片/固定和染色后过去多长时间?
- 如何储存未染色的切片?
染色实验步骤
- 抗原修复。
- 封闭方法。
- 稀释缓冲液(包括去垢剂)。
- 一抗孵育时间/温度。
- 二抗孵育时间/温度。
- 请列出相同切片上使用的其他一抗。
- 您是否确定靶标存在于这些细胞/组织?
- 如果您使用磷酸抗体,那么该实验步骤是否会影响该靶标的磷酸化(经发表的参考文献或其他应用确认)?
- 阳性对照(处理的细胞、其他组织等)。
- 阴性对照:
- 无一抗
- 同型对照
- 阴性细胞/组织
- Ig 同型对照抗体浓度(如果适用)。