有多种 ELISA 方法和检测化学品可让研究人员进行合适的检测,来回答某个特定的实验问题。利用不同的方法会影响观察到的信号以及可测量蛋白浓度的动态范围。
在 CST,我们从经高度验证的抗体开始,确定每个夹心 ELISA 试剂盒的最佳抗体对。ELISA 产品在生物相关模型中经过严格测试,确保了特异性和最佳信噪比。
测定某种分析物的绝对浓度需要一条对已知数量的抗原进行梯度稀释产生的标准曲线。通过将数值与标准曲线进行比较来定量每个样品的信号,以确定浓度。
还可以通过对样品进行相互比较或将样品与一个参考样品进行比较来确定相对定量。使用血清抗体的一个基线样品来比较感染后的一份血清抗体样品来确定倍数变化。
ELISA 定性分析可确定靶标分析物的存在或缺失,并在研究只需要一个阳性信号或阴性信号时使用。可以通过观察与某个空白样品或阴性对照相比的任何信号来确定分析物的存在。
一般来说,使用分光光度计测量每个 ELISA 孔的读数,且读数以数值表示并以相对光单位 (RLU) 或相对荧光单位 (RFU) 对比分析物浓度对数的形式报告。对每个孔进行相互比较或与一个对照进行比较,以确定蛋白的相对量,或者可以在与一条标准曲线进行比较时确定确切浓度。
与夹心 ELISA 相比,竞争/抑制 ELISA 在信号与分析物数量之间有负相关关系。