免疫组织化学法 (Leica^®BOND™)

注：Please see product datasheet or product webpage for appropriate antibody dilution^.

	步骤	试剂	时间/温度
1	脱蜡	BOND™ Dewax Solution、100% 乙醇、BOND™ Wash Solution	预编程的 Leica® BOND™
2	抗原修复	BOND™ Epitope Retrieval ER2 Solution	20 分钟，100˚C | 实验步骤：用 ER2 进行 HIER 20 分钟
3	过氧化物封闭液	Refine Detection Kit Peroxide Block*	5 分钟
	洗涤	BOND™ Wash Solution	3x 0:00 分钟
4	蛋白封闭液（可选）	#5425 NGS 或 #15019 Animal-Free Blocking Solution	20 分钟
5	一抗^	用 #8112 SignalStain® Antibody Diluent 稀释	60 分钟
	洗涤	BOND™ Wash Solution	3x 2:00 分钟
6	Post Primary Mouse Linker	Refine Detection Kit Post Primary*	10 分钟
	洗涤	BOND™ Wash Solution	3x 2:00 分钟
7	二次检测	Refine Detection Kit Polymer*	10 分钟
	洗涤	BOND™ Wash Solution/Deionized Water	定制（参见下文）
8a	可视化	Refine Detection Kit Mixed DAB Refine*	0:00 分钟
8b	可视化	Refine Detection Kit Mixed DAB Refine*	10 分钟
	洗涤	去离子水	3x 0:00 分钟
9	复染	Refine Detection Kit Hematoxylin*	5 分钟
	洗涤	去离子水	0:00 分钟
	洗涤	BOND™ Wash Solution	0:00 分钟
	洗涤	去离子水	0:00 分钟
10	脱水（离线）：
	在 95% 乙醇中孵育切片 2 次，每次 10 秒。
	在 100% 乙醇中重复孵育 2 次，每次 10 秒。
	在二甲苯中重复孵育 2 次，每次 10 秒。
11	用盖玻片和 #84583 SignalStain® Mounting Medium 封片。
	可选订制洗涤：	BOND™ Wash Solution	2:00
		BOND™ Wash Solution	分配器类型：打开 0：00
		BOND™ Wash Solution	2:00
		BOND™ Wash Solution	分配器类型：打开 0：00
		BOND™ Wash Solution	0:00
		去离子水	0:00

*BOND™ Polymer Refine Detection Kit（货号：DS9800）中所含的试剂

LEICA^® 是 Leica Microsystems IR GmbH 的注册商标。

BOND™ 是 Leica Biosystems Melbourne Pty. Ltd 的商标。CST 和 Leica Microsystems IR GmbH 或 Leica Biosystems Melbourne Pty. Ltd 之间没有附属或赞助关系。