Cat. # | Size | Price | Inventory |
---|---|---|---|
95735S | 100 µl (50 tests) |
REACTIVITY | H M R |
SENSITIVITY | Endogenous |
MW (kDa) | |
Source/Isotype | Rabbit IgG |
Product Information
Application | Dilution |
---|---|
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) | 1:50 |
All reagents required for this protocol may be efficiently purchased together in our Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593, or individually using the catalog numbers listed below.
NOTE: Prepare solutions with reverse osmosis deionized (RODI) or equivalent grade water.
NOTE: When including fluorescent cellular dyes in your experiment (including viability dyes, DNA dyes, etc.), please refer to the dye product page for the recommended protocol. Visit www.cellsignal.com for a full listing of cellular dyes validated for use in flow cytometry.
NOTE: Adherent cells or tissue should be dissociated and in single-cell suspension prior to fixation.
NOTE: Optimal centrifugation conditions will vary depending upon cell type and reagent volume. Generally, 150-300g for 1-5 minutes will be sufficient to pellet the cells.
NOTE: If using whole blood, lyse red blood cells and wash by centrifugation prior to fixation.
NOTE: Antibodies targeting CD markers or other extracellular proteins may be added prior to fixation if the epitope is disrupted by formaldehyde and/or methanol. The antibodies will remain bound to the target of interest during the fixation and permeabilization process. However, note that some fluorophores (including PE and APC) are damaged by methanol and thus should not be added prior to permeabilization. Conduct a small-scale experiment if you are unsure.
NOTE: Count cells using a hemocytometer or alternative method.
posted July 2009
revised June 2020
实验步骤编号:407
人, 小鼠, 大鼠
使用与人 PIP4K2C 蛋白的 Leu321 周围残基相对应的合成肽,对动物免疫接种来产生单克隆抗体。
磷脂酰肌醇-5-磷酸 4-激酶 (PIP4K) 合成磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸 (PtdIns(4,5)P2),后者是磷酸肌醇信号转导中直接调节信号转导蛋白活性和细胞进程的一个关键前体。PIP 激酶有两个亚家族:I 型和 II 型,它们可以从不同底物池中产生 PtdIns(4,5)P2。PIP4 I 型激酶使用 PtdIns5P 作为底物,而 PIP5 II 型激酶则使用 PtdIns4P (1,2)。在哺乳动物细胞中,已发现每个 PIP4K 和 PIP5K 亚家族中由不同基因编码的三种同工型 (3-7)。所有 PIP 激酶均被磷脂酸刺激,并受 ARF 和 Rho GTP 酶广泛调节,同时通过蛋白激酶 A 和 PI 刺激的自磷酸化抑制 (8)。
PIP4K2C,也称为磷脂酰肌醇 5 磷酸 4 激酶 2 型 γ (PI5P4Kγ),是 II 型 PIP 激酶家族的成员,以肾脏和脑组织中最高表达水平广泛表达 (9)。PIP4K2C 可以与其另外两个已知的家族成员 PIP4K2A 和 PIP4K2B 形成同型二聚体或异二聚体 (10)。PIP4K2C 是雷帕霉素复合体 1 (mTORC1) 信号转导的哺乳动物靶标的调节物,并且 Pip4k2c KO 小鼠表现出增强的免疫应答并形成自身免疫 (11,12)。
探索与本品相关的通路。
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