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使用内源性和标记性蛋白模型验证蛋白与免疫共沉淀的相互作用

 

免疫沉淀法(IP)利用抗体的特异性来富集样品中的蛋白质并研究其与其他大分子的相互作用。本演示文稿包括用于免疫共沉淀(co-IP)的一般工作流程以及在设置实验之前应考虑的事项,包括:

  • 模型系统的选择;
  • 细胞裂解缓冲液的选择以及何时包括预先清除步骤;
  • 一抗稀释和磁珠选择;
  • 如何减轻重链和轻链对 IgG 的掩盖作用;
  • 将表位标签用于 IP:优势和关键的优化考虑事项;
  • 针对翻译后修饰的 IP 实验对照物。

有关设置 IP 实验的更多专家指南,请观看以下技术提示视频:如何选择用于蛋白质免疫沉淀分析的抗体