重要事项：请参阅产品数据表首页或产品网页上的“应用”版块，以确定某件产品是否已经验证且获批在 Leica BOND 上使用。如果是，请参阅产品特定实验步骤，了解具体说明。对于没有经验证的 Leica BOND 实验步骤的产品，下面所列的条件可作为一个起点。
| 步骤 | 试剂 | 时间/温度 | |
|---|---|---|---|
| 1 | 脱蜡 | BOND Dewax Solution、100% 乙醇、BOND Wash Solution | 预编程的 Leica BOND |
| 2 | 抗原修复 | BOND 表位修复 ER2 溶液 | 20 分钟，100˚C | 实验步骤：用 ER2 进行 HIER 20 分钟 |
| 3 | 过氧化物封闭液 | Refine Detection Kit Peroxide Block* | 5 分钟 |
| 洗涤 | BOND 洗涤液 | 3x 0:00 分钟 | |
| 4 | 蛋白封闭液（可选） | #5425 NGS 或 #15019 Animal-Free Blocking Solution | 20 分钟 |
| 5 | 一抗 | 用 #8112 SignalStain® Antibody Diluent 稀释 | 30 分钟 |
| 洗涤 | BOND 洗涤液 | 3x 2:00 分钟 | |
| 不适用 | Post Primary Mouse Linker | Refine Detection Kit Post Primary* | 不适用于兔抗体，小鼠抗体为 10 分钟 |
| 6 | 二次检测 | Refine Detection Kit Polymer* | 10 分钟 |
| 洗涤 | BOND 洗涤液/去离子水 | 定制（参见下文） | |
| 7a | 可视化 | Refine Detection Kit Mixed DAB Refine* | 0:00 分钟 |
| 7b | 可视化 | Refine Detection Kit Mixed DAB Refine* | 10 分钟 |
| 洗涤 | 去离子水 | 3x 0:00 分钟 | |
| 8 | 复染 | Refine Detection Kit Hematoxylin* | 5 分钟 |
| 洗涤 | 去离子水 | 0:00 分钟 | |
| 洗涤 | BOND 洗涤液 | 0:00 分钟 | |
| 洗涤 | 去离子水 | 0:00 分钟 | |
| 9 | 脱水（离线）： | ||
| 在 95% 乙醇中孵育切片 2 次，每次 10 秒。 | |||
| 在 100% 乙醇中重复孵育 2 次，每次 10 秒。 | |||
| 在二甲苯中重复孵育 2 次，每次 10 秒。 | |||
| 10 | 用盖玻片和 #14177 SignalStain® Mounting Medium 封片。 | ||
| 可选订制洗涤： | BOND 洗涤液 | 2:00 | |
| BOND 洗涤液 | 分配器类型：打开 0：00 | ||
| BOND 洗涤液 | 2:00 | ||
| BOND 洗涤液 | 分配器类型：打开 0：00 | ||
| BOND 洗涤液 | 0:00 | ||
| 去离子水 | 0:00 | ||
*BOND Polymer Refine Detection Kit（货号：DS9800）中所含的试剂
Leica 是 Leica Microsystems IR GmbH 的注册商标。
BOND 是 Leica Biosystems Melbourne Pty. Ltd. CST 和 Leica Microsystems IR GmbH 或 Leica Biosystems Melbourne Pty. Ltd 之间没有隐含的附属或赞助关系。
发布时间 2019 年 7 月