XTT 细胞活力检测实验步骤

针对： XTT Cell Viability Kit #9095。

A. 试剂制备

1. 实验前解冻试剂。

注：试剂保存在 -20°C 下时可能会发生沉淀。使用前，确保试剂澄清。如有必要，加热试剂到 37°C 后再重新配制。

2. 添加电子偶联溶液到 XTT 试剂中（容积比 1:50）来配制 XTT 检测溶液。例如，每个 96 孔板需要 5 ml XTT 溶液和 0.1 ml 电子偶联溶液。

B. XTT 测定法

1. 向 96 孔板（每孔含有 100-200 µl 培养基）的每孔添加 50 µl XTT 检测溶液，随后将平板放回恒温器。
2. 读取 450 nm 处的吸光度。

注：这种检测的最佳孵育时间取决于实验设计，例如：细胞类型、细胞数量和处理方式。添加 XTT 检测溶液后，在不同时间点读取一块平板可确定最佳孵育时间（如图所示）。