Cat. # | Size | Price | Inventory |
---|---|---|---|
16344S | 100 µl (50 tests) |
REACTIVITY | H M |
SENSITIVITY | Endogenous |
MW (kDa) | |
Source/Isotype | Rabbit IgG |
Product Information
Application | Dilution |
---|---|
Flow Cytometry (Fixed/Permeabilized) | 1:50 |
All reagents required for this protocol may be efficiently purchased together in our Intracellular Flow Cytometry Kit (Methanol) #13593, or individually using the catalog numbers listed below.
NOTE: Prepare solutions with reverse osmosis deionized (RODI) or equivalent grade water.
NOTE: When including fluorescent cellular dyes in your experiment (including viability dyes, DNA dyes, etc.), please refer to the dye product page for the recommended protocol. Visit www.cellsignal.com for a full listing of cellular dyes validated for use in flow cytometry.
NOTE: Adherent cells or tissue should be dissociated and in single-cell suspension prior to fixation.
NOTE: Optimal centrifugation conditions will vary depending upon cell type and reagent volume. Generally, 150-300g for 1-5 minutes will be sufficient to pellet the cells.
NOTE: If using whole blood, lyse red blood cells and wash by centrifugation prior to fixation.
NOTE: Antibodies targeting CD markers or other extracellular proteins may be added prior to fixation if the epitope is disrupted by formaldehyde and/or methanol. The antibodies will remain bound to the target of interest during the fixation and permeabilization process. However, note that some fluorophores (including PE and APC) are damaged by methanol and thus should not be added prior to permeabilization. Conduct a small-scale experiment if you are unsure.
NOTE: Count cells using a hemocytometer or alternative method.
posted July 2009
revised June 2020
实验步骤编号:407
人, 小鼠
牛
使用与人 CD19 蛋白中 Leu427 周围残基相对应的合成肽,对动物进行免疫接种来产生单克隆抗体。
CD19 是一种 95 kDa 的共受体,它能在 B 细胞中放大信号转导级联反应 (1)。在 B 细胞表面,CD19 结合 CD21、CD81 和 Leu-13 并发挥作用。CD19 的胞质尾区有 9 个保守的酪氨酸残基,这些残基通过将信号转导分子偶联到其受体上在 CD19 介导的功能中发挥重要作用 (1)。B 细胞受体或 CD19 连结后,CD19 的 Tyr531 和 Tyr500 位点被逐渐磷酸化。此磷酸化会使 PI3 激酶和 Src 家族的酪氨酸激酶偶联到 CD19 并激活 PI3K 和 Src 信号转导通路 (2,3)。B 细胞受体与 CD19 的共结合也促进了 CD19 中 Tyr409 位点的磷酸化。在这些位点的磷酸化也使得它能够结合 Vav 并介导增强的胞内钙反应和 JNK 信号通路 (4,5)。
探索与本品相关的通路。
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